과정 이해 :
1. 트리스베이스 : 트리스 (트리스 (하이드 록시 메틸) 아미노 메탄)는 약한 염기입니다. 트리스베이스의 솔루션으로 시작합니다.
2. HCl 첨가 : pH를 7.5로 조정하려면 TRIS베이스 솔루션에 HCl (강산)을 추가합니다. 이것은 트리스 컨쥬 게이트 산을 형성하기 위해 트리스베이스와 반응합니다.
3. 버퍼 형성 : 트리스베이스 및 그의 접합체 산은 원하는 pH를 유지하는 데 도움이되는 완충 시스템을 형성한다.
누락 된 정보 :
* 트리스베이스의 농도 : 당신은 당신이 시작하는 Tris Base Solution의 농도를 알아야합니다. 필요한 HCL의 양은 TRIS베이스의 초기 양에 따라 다르기 때문에 이것은 중요합니다.
* 최종 버퍼 볼륨 : 준비하려는 Tris 버퍼 솔루션의 최종 볼륨을 알아야합니다. 이렇게하면 적절한 양의 Tris Base 및 HCl을 계산하는 데 도움이됩니다.
일반적인 접근 :
1. 트리스베이스의 두더지를 계산합니다 : 버퍼의 최종 부피에 의해 Tris Base Solution의 농도에 곱하십시오.
2. 필요한 HCl의 두더지를 계산합니다. 이는 원하는 pH (7.5) 및 TRI의 PKA (약 8.1)에 따라 다릅니다. 이를 결정하려면 Henderson-Hasselbalch 방정식을 사용해야합니다.
3. 5m HCl의 부피를 계산합니다 : HCL 용액 (5M)의 농도로 필요한 HCL의 두더지를 나눕니다.
예 :
5M HCl 용액을 사용하여 pH 7.5에서 100ml의 0.1m 트리스 버퍼를 준비한다고 가정 해 봅시다.
1. 트리스베이스의 두더지 : 0.1 mol/l * 0.1 L =0.01 몰의 트리스베이스
2. HCl의 두더지 : Henderson-Hasselbalch 방정식 사용 :
pH =pka + log ([tris base]/[tris conjugate acid])
7.5 =8.1 + log ([Tris Base]/[Tris Conjugate Acid])
-0.6 =log ([Tris Base]/[Tris Conjugate Acid])
[Tris Base]/[Tris conjugate acid] =0.25
0.01 몰의 트리스베이스로 시작하므로 0.01 * 0.25 =0.0025 몰의 트리스 컨쥬 게이트 산이 필요합니다. 이것은 0.01-0.0025 =0.0075 몰의 HCl이 필요하다는 것을 의미합니다.
3. 5m HCl의 부피 : 0.0075 몰 / 5 mol / L =0.0015 L 또는 1.5 ml
중요한 참고 : 이것은 단순화 된 예입니다. 강한 산으로 작업 할 때 항상 계산을 다시 확인하고 적절한 안전 예방 조치를 사용하십시오.
