
1960 년대 이래로 전 세계적으로 200 종 이상의 양서류 종이 멸종되었으며, 이러한 멸종의 대부분은 지난 20 년 동안 발생했습니다. Rabb의 프린지 제한 나무 개구리는 최근 thoughie 가 성장하는 목록에 추가되었습니다. , 그의 종류의 마지막은 2016 년 9 월 조지아 애틀랜타 식물원에서 입양 된 집에서 사망했습니다.

최근의 많은 비슷한 사례가 있으며, 그러한 독특한 생물학적 특성과 다양성의 상실이 우리의 눈앞에서 일어나고 있다는 비극입니다. 적어도 950 개의 개구리 종이 멸종 위기에 처해 있고, Toughie와 같은 방식으로 갈 준비가되어 있으며 상황이 너무 심해서 중재적인 축산 보호가 생존의 유일한 기회 인 것처럼 보입니다. 불행히도, 현재이 종 중 약 50 개만 돌보기에 충분한 자원이 존재합니다. 다른 900 종은 어떻게 될까요?
양서류 멸종 위기의 주요 원동력은 직접 서식지 파괴와 관련 질병 (예 :Chytrid 곰팡이), 살충제 노출 및 경쟁 분화를 통한 인간 활동입니다. 서식지 보존 이니셔티브의 구현은 선택된 인구를 확보하는 데 성공했습니다. 가장 신뢰할 수 있고 지속적인 보호 도구로서, 이러한 프로그램은 최우선 과제로 유지하고 확장되어야합니다. 그러나 더 넓은 보완 기술 제품군은 현재의 단기를 해결하기 위해 빠른 개발이 필요하다는 것이 분명합니다.
IVF와 같은 보조 생식 기술 ( in vitro 수정)는 보존 프로그램을 보완하며 더 많은 진전이 필수적인 한 영역을 나타냅니다. 신뢰할 수있는 난자 및/또는 배아 동결 기술은 장기 종 생존에 필요하며, 서식지가 충분히 복원 될 때까지 IVF 재료를 보호 할 수 있습니다. 그러나 복잡성으로 인해이 전선의 진보는 느 렸습니다. 그 동안 무엇을 할 수 있습니까?
개구리 세포 배양 및 세포 동결은 이러한 방식으로 각 대표적인 개구리 종의 영구적 인 유전자 및 세포 기록이 무기한으로 저장되어 다른 기술 과이 문제의 비판적 특성에 대한 우리의 인식, 따라 잡기에 충분한 시간을 제공 할 수 있기 때문에 탐구해야 할 분명한 발달 경로입니다. 또한, 이러한 세포는 유도 된 다 능성 줄기 세포 (IPSC) 생산의 공급원을 나타내며, 따라서 IVF 및 체세포 핵 전달 (SCNT) 클로닝 기술뿐만 아니라 인공 게임 구조.
놀랍게도, 개구리 세포의 성공적인 배양은 역사적으로 드문 성취였습니다. 최근에, 우리는 개구리 세포 배양 및 냉동 보존과 관련된 기술을 개발하는 데 시간을 보냈습니다. 우리는 질병이나 부상으로 인해 개구리에서 조직 샘플을 어떻게 수집 할 수 있는지 설명했습니다. 각 종의 배양 물로부터의 다수의 바이알은 액체 질소에서 -196 ℃에서 동결된다. 몇 달 후, 하나의 대표적인 튜브가 해동되고 다시 배양되어 세포가 여전히 살아 있고 정상적인 염색체 보체가 있음을 보여줍니다. 이들 세포는 액체 질소에 저장되기 때문에, 해당 종의 살아있는 세포 기록뿐만 아니라 보조 생식, 리포먼스 및 탈퇴 이니셔티브를위한 물질은 이론적으로 적어도 100,000 년 동안 존재할 수있다.
.이 기술은 여전히 존재하는 개구리 종에 대해 괜찮습니다. 그러나 그의 종의 마지막이었고 어떤 세포 저장 기술이 아직 개발되지 않은 Toughie와 같은 개구리는 어떻습니까? 다른 일을 알지 못한 연구원들은 때때로 스토리지를 위해 -80c 냉동고의“마지막으로”개구리 종의 조직을 배치하여 기술을 부활시키기위한 기술이 개발 될 수있는 시간을 기다렸다. 그러한 사건을 기대할 때, 우리는 이러한 배양 기술을 예비 탈선 프로그램에서 사용하여 냉동 방지제가없는 상태에서 -80 ° C에 배치 된 조직에서 살아있는 세포를 추출했습니다.
.미공개 원칙 증명 운동에서, 우리는 5 개월 동안 -80 ° C 냉동고의 죽은 Jervis Bay Tree 개구리에서 조직을 저장했습니다. (Jervis Bay Tree Frogs는 현재 멸종 위기에 처해 있지 않습니다). 우리는이 조직에 배양 기술을 적용했으며 살아있는 세포를 분리 할 수있었습니다. 랜덤 세포 집단 샘플로부터, 분석 된 33 개의 세포는 정상적인 염색체 함량을 가졌으며, 이론적으로는 이들 세포가 적어도 클로닝에 적합 하므로이 하나의 개구리의 "x-extinction"이라는 것을 의미한다.
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역사적으로, 개구리는 1770 년 Spallanzini가 수행 한 최초의 성공적인 IVF 실험에서 사용되었을 것입니다. 1907 년 Harrisson의 개구리 신경의 배양은 성공적인 동물 세포 배양의 첫 번째 예로 기록됩니다. Briggs와 King은 1952 년 첫 번째 성공적인 복제 실험에서 개구리 세포를 사용했습니다. 이러한 모든 획기적인 과학적 돌파구가 멸종에서 개구리를 구하고 최근 지구에서 사라진 사람들을 다시 가져 오는 데 사용될 수 있다면 보상을 줄 것입니다. 터프 티와 같은 개구리가 스스로를 구할 수 있도록 환경을 보호하기에 충분한 인식이 만들어 졌다면 더욱 보람이있을 것입니다.
이러한 문화 기술은 (i) chationy cryobiology 에 최근에 발표 된 핵형 적으로 검증 된 호주 양서류 세포의 문화, 균열 및 전환 및 전환의 제목의 기사에 설명되어있다. , (ii) 배양 및 냉동 Litoria Infrafrenata의 Karyomaps 최근에 데이터로 출판 된 개구리 및 올챙이 세포는 . 이 작품은 멜버른 대학교의 수의학 및 농업 과학 학부의 명예 동료 인 Richard Mollard에 의해 수행되었습니다.
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