차동 염색 과정은 얼룩이 endospores에 사용됩니다. 말라카이트 녹색은 샘플 내에서 식물성 세포와 엔도 스포어를 모두 염색하는 1 차 얼룩이다. 그런 다음 열을 사용하면 1 차 얼룩을 엔도 디스 포어로 침투하는 데 도움이됩니다. 탈색 후, 카운터 스테인 사 프라 닌은 배경을 염색하는 데 사용됩니다.
bacillus 로 알려진 2 개의 병원성 속 및 clostridium 부작용 환경 조건에 저항하기 위해 신진 대사 비활성 엔도 스포어를 생성합니다. 엔도 스포는 다수의 치명적인 질병을 일으키기 때문에 임상 샘플에서는 이들의 식별이 매우 중요합니다.
주요 영역이 적용됩니다
1. endospores는 무엇입니까
- 정의, 사실
2. endospore 염색
- 엔도 스포어 염색 기술
3. Endospore 염색에 열이 사용되는 이유
- 열 사용
주요 용어 :엔도 스포어, 열, 말라카이트 녹색, 모공, 식물 세포
endospores는 무엇입니까
endospore는 bacillus 과 같은 일부 병원성 박테리아 속에 의해 생성 된 저항성 구조입니다. 및 clostridium 불리한 환경 조건에서 생존하기 위해. 이러한 바람직하지 않은 조건은 열, 건조, 방사선 또는 화학 물질 일 수 있습니다. 식물성 세포로부터 엔도 스포어의 생산 과정을 포자라고한다. 프로세스를 완료하는 데 8-10 시간이 걸릴 수 있습니다. 엔도 스포어는 박테리아 세포 내부에 존재하거나 자유 포자로 존재할 수 있습니다. endospore 형성은도 1에 도시되어있다.
그림 1 :엔도 디포 포르 형성
endospores는 대사 적으로 비활성이거나 휴면 상태입니다. 그것들은 소량의 세포질 및 DNA가 보호 외부 덮개로 덮여 있습니다. 세포벽은 디피 콜린 산으로 구성되어 엔 스포 포에 내열성 특성을 제공합니다. Endospores는 환경 조건이 유리할 때 새로운 유기체를 생산하기 위해 발아합니다. 121 ℃에서 15 분 동안 촉촉한 열의 처리는 박테리아 엔도 스포어를 파괴 할 수있다.
endospore 염색
endospore 염색은 시편의 다른 구조가 다른 색상으로 염색되는 염색의 차동 과정입니다. 그것은 식물성 세포로부터 엔도 스포어를 식별 할 수있게한다. 표준 엔도 포지 염색 과정은 Schaeffer-Dulton 기술입니다. 이 기술의 1 차 얼룩은 말라카이트 그린이며, 카운터 스테인은 사 프라 닌입니다.
Schaeffer-Dulton Technique-절차
1. 현미경 슬라이드에서 번짐 후 박테리아 샘플이 말라카이트 녹색 용액으로 포화되도록합니다.
2. 그런 다음 염료가 증발하기 시작할 때까지 3-5 분 동안 슬라이드를 부드럽게 가열합니다.
3. 슬라이드를 식히고 탈색을 위해 물로 씻으십시오.
4. 마지막으로, 카운터 스테이닝 후 슬라이드를 헹굽니다.
5. 슬라이드를 공기 건조시키고 현미경으로 관찰하십시오.
여기서, 엔도 스포어는 말라카이트 녹색과 녹색으로 염색되며 식물성 세포는 사프라닌과 분홍색으로 염색됩니다. Schaeffer-Dulton Technique에 의한 염색 된 엔도 스포어는 그림 2 에 나와 있습니다. .
그림 2 :endospores (녹색) 및 vgetative cells (분홍색)
엔도 디스포르 염색의 대체 기술을 Doner의 방법으로 식별 할 수 있습니다. 이 방법에서 엔도 스포어는 빨간색으로 염색됩니다.
Endospore 염색에 열이 사용되는 이유
endospores의 케라틴 덮개는 얼룩에 저항합니다. 따라서, 1 차 얼룩은 엔도 디스 포어로 강제되어야한다. 열을 사용하는 것은 1 차 얼룩의 엔도 디스 포르로의 침투를 향상시키는 것입니다. 말라카이트 녹색이있는 슬라이드는 최대 3-5 분까지 가열 될 수 있습니다. 가열 시간은 엔도 스포어의 벽에 침투 된 염료량의 양에 직접 비례합니다. 가열 시간이 길면 엔도 디포 포르 벽에 모공을 만들어 더 많은 염료의 침투를 용이하게합니다.
결론
endospores는 대부분의 병원성 박테리아의 생식 세포입니다. 따라서 샘플에서 엔도 스포어를 식별하는 것은 진단에서 중요합니다.
참조 :
1.“엔도 디포르 얼룩 - 정의, 기술 및 절차 이해.” 현미경 , 여기에서 사용할 수 있습니다.
이미지 제공 :
1. "Endospore Formation", Farah, Sophia, Alex-Commons Wikimedia
2를 통한 자신의 작업 (CC By-SA 4.0). "Bacillus subtilis spore"의 Y Tambe (Original Uploader)-Commons Wikimedia를 통해 자신의 작업 (CC By-SA 3.0)
