주요 차이 간접 및 샌드위치 ELISA 사이에는 간접 ELISA에서 가 마이크로 테이터 플레이트가 샘플로 코팅되는 반면,이 플레이트는 샌드위치 ELISA에서 1 차 항체로 코팅 된 반면 . . 또한 샌드위치 ELISA는 간접 ELISA보다 2-5 배 민감한 방법입니다.
간접 및 샌드위치 ELISA는 고체상 효소 면역 분석 (EIA) 인 ELISA (효소-연결 면역 흡착 분석)의 두 가지 방법입니다. 그것들은 비교적 민감한 방법이며 더 빠르고 재현 가능합니다.
주요 영역을 다루었습니다
1. 간접적 인 Elisa
- 정의, 절차, 중요성
2. 샌드위치 엘리사
- 정의, 절차, 중요성
3. 간접 및 샌드위치 엘리사 의 유사점은 무엇입니까?
- 일반적인 기능의 개요
4. 간접 및 샌드위치 엘리사의 차이점은 무엇입니까
- 주요 차이점 비교
주요 용어
ELISA, 효소-연결된 이차 항체, 간접 ELISA, 1 차 항체, 샌드위치 ELISA, 감도
간접 Elisa
간접 ELISA는 샘플에서 특정 단백질의 검출 및 정량을 위해 두 가지 유형의 항체를 사용하는 2 단계 ELISA의 한 유형입니다. 간접 ELISA의 절차는 다음과 같습니다.
- 마이크로 테이터 플레이트의 표면을 샘플과 코팅;
- 접시에서 결합되지 않은 단백질을 제거하기 위해 세척;
- 단백질 코팅 된 마이크로 티터 플레이트와 1 차 항체의 배양;
- 접시에서 결합되지 않은 항체를 제거하기 위해 세척;
- 효소-연결된 이차 항체와 마이크로 타이 터 플레이트의 인큐베이션;
- 접시에서 결합되지 않은 항체를 제거하기 위해 세척;
- 효소 반응에 의해 요구되는 상응하는 발색 적 기질의 첨가;
- 플레이트에서 생성 된 신호의 검출.
그림 1 :간접 엘리사
일반적으로 간접 ELISA는 병원성 항원에 대한 신체에 의해 생성 된 항체를 정량화하여 박테리아, 바이러스 또는 기생충 감염을 진단하는 좋은 방법입니다. 여기서, 폴리 클로 날 항체는 간접 ELISA에서 이차 항체로서 사용될 수있다. 따라서 더 경제적입니다. 한편, 상이한 수의 상이한 유형의 1 차 항체를 사용하여 표적 단백질과 결합 할 수있다. 따라서 간접 ELISA는 표적 단백질의 검출을위한보다 유연하고 민감한 방법입니다.
샌드위치 엘리사
샌드위치 ELISA는 2 단계 ELISA의 다른 유형이며, 이는 1 차 및 효소-연결된 2 차 항체를 모두 사용하여 검출을 위해 사용합니다. 샌드위치 ELISA의 주요 특징은 1 차 항체와 2 차 항체 사이에 관심있는 단백질의 샌드위치가 있다는 것입니다. 샌드위치 ELISA의 절차는 다음과 같습니다.
- 마이크로 테이터 플레이트의 표면을 1 차 항체로 코팅;
- 접시에서 결합되지 않은 1 차 항체를 제거하기 위해 세척;
- 샘플과 마이크로 타이 터 플레이트의 인큐베이션;
- 접시에서 결합되지 않은 단백질을 제거하기 위해 세척;
- 효소-연결된 이차 항체와 마이크로 타이 터 플레이트의 인큐베이션;
- 접시에서 결합되지 않은 이차 항체를 제거하기 위해 세척;
- 효소 반응에 의해 요구되는 상응하는 발색 적 기질의 첨가;
- 플레이트에서 생성 된 신호의 검출.
그림 2 :샌드위치 엘리사
샌드위치 ELISA는 저에서 높은 분자량 단백질을 감지하는 것이 좋습니다. 또한 직접 또는 간접 ELISA보다 더 민감합니다 (2-5 배). 또한 샌드위치 ELISA는 표적 단백질을 포착하기 위해 두 가지 항체를 사용하기 때문에보다 구체적인 기술입니다.
간접 및 샌드위치 엘리사 사이의 유사성
- 간접 및 샌드위치 ELISA는 생물학적 샘플에서 단백질을 감지하고 정량화하는 데 도움이되는 두 가지 유형의 ELISA 방법입니다.
- 두 유형의 ELISA 방법 모두 2 단계 방법으로 구성됩니다.
- 또한, 그들은 항원, 항체, 호르몬 등을 포함한 특정 단백질의 검출을 위해 1 차 항체 및 효소-연결된 이차 항체를 모두 사용한다. .
- 또한이 두 가지 유형의 분석에 두 가지 유형의 항체가 관여하기 때문에 특이성이 높습니다.
- 게다가 두 방법 모두 고 처리량 방법으로 매우 민감합니다. 그들은 더 빠르고 재현 가능한 분석법입니다.
간접 및 샌드위치 엘리사의 차이
정의
간접 ELISA는 2 단계 ELISA를 말합니다. 2 단계 ELISA는 1 차 항체의 2 개의 결합 과정과 2 차 항체로 표지되어있는 반면 샌드위치 ELISA는 관심있는 단백질이 1 차 및 2 차 항체 사이에 샌드위치되는 다른 2 단계 ELISA 유형을 나타냅니다. 따라서 이것은 간접 및 샌드위치 엘리사의 주요 차이점입니다.
마이크로 타이 터 플레이트 코팅
간접 ELISA에서 마이크로 테이터 플레이트의 코팅은 단백질을 가진 샘플이고 샌드위치 ELISA에서 코팅은 1 차 항체입니다.
2 차 항체의결합
2 차 항체는 간접 ELISA에서 1 차 항체에 결합하는 반면 2 차 항체는 샌드위치 ELISA에서 관심있는 단백질에 결합합니다.
감도
간접 및 샌드위치 ELISA의 또 다른 차이점은 간접 ELISA가 민감한 방법이고 샌드위치 ELISA는 간접 ELISA보다 2-5 배 민감하다는 것입니다.
응용
간접 ELISA는 샘플의 총 항체 농도를 결정하는 데 더 좋습니다. 샌드위치 ELISA는 복잡한 샘플 분석에 더 좋습니다. 따라서 이것은 간접 및 샌드위치 엘리사의 또 다른 차이점입니다.
결론
간접 ELISA는 마이크로 테이터 플레이트상의 관심있는 단백질에 대한 1 차 항체의 결합에 관여 한 2 단계 ELISA의 한 유형이며,이어서 효소-연결 2 차 항체에 의한 검출. 한편, 샌드위치 ELISA는 1 차 항체에 관심있는 단백질의 결합에 관여하는 2 단계 ELISA의 다른 유형이며, 마이크로 터 플레이트를 코팅 한 다음 효소-연결된 이차 항체로 검출한다. 따라서 간접 및 샌드위치 엘리사의 주요 차이점은 절차의 순서입니다.