역사적으로 , 클로로포름은 페놀 클로로포름 추출의 일부로 사용되었다. 방법. 작동 방식은 다음과 같습니다.
* 세포 용해 : 첫 번째 단계는 DNA를 방출하기 위해 세포를 열어 두는 것이 포함되었습니다.
* 페놀 : 이어서 페놀을 혼합물에 첨가 하였다. 페놀은 단백질을 DNA로부터 분리하는 강력한 변성제이다.
* 클로로포름 : 클로로포름을 첨가하여 2 상 시스템을 생성 하였다 , 두 층을 의미합니다. 상부 층은 DNA와의 수성 용액을 함유 한 반면, 하부 층은 페놀 및 변성 단백질을 함유 하였다.
클로로포름이 더 이상 사용되지 않는 이유 :
* 안전 : 클로로포름은 독성 및 발암 성 화합물로 연구자들에게 상당한 위험을 초래합니다.
* 효율성 : 스핀 컬럼 또는 자기 비드 기반 추출과 같은 현대적인 방법은 페놀 클로로포름 방법보다 훨씬 빠르고 쉽고 안전합니다. 이러한 기술은 DNA를 분리하기 위해 다른 원칙에 의존합니다.
클로로포름 대신 현대 DNA 추출을 사용합니다.
* 버퍼 : 완충제는 세포를 해독하고 다른 세포 성분들로부터 DNA를 분리하기 위해 올바른 pH 및 염 농도를 생성하는데 사용된다.
* 효소 : 단백질 제 K와 같은 효소는 단백질을 소화하는데 사용되며, 다른 세포 성분으로부터 DNA를 추가로 분리한다.
* 스핀 컬럼 또는 자기 구슬 : 이들 물질은 DNA에 결합하여 나머지 샘플로부터 분리 및 정제를 허용한다.
요약하면, 클로로포름은 한 번 DNA 추출에 사용되었지만 더 이상 안전하거나 효율적인 방법으로 간주되지 않습니다. 현대 DNA 추출 기술은 대체 방법을 활용하여 안전성과 편의성을 높이고 동일한 결과를 달성합니다.
