1. 크기와 해상도 :
* 작은 크기 : 많은 소기관은 엄청나게 작으며, 종종 고성능 가벼운 현미경의 해결 능력보다 낮습니다. 이것은 광파가 빛의 파장보다 더 가까운 점을 구별하여 이미지를 흐리게하는 것을 의미합니다.
* 해상도 제한 : 광학 현미경은 약 200 나노 미터의 이론적 해상도 한계를 갖는다. 리보솜이나 골지 장치의 cisternae와 같은 이보다 작은 소기관은 흐릿하거나 불분명하게 보입니다.
2. 염색 기술 :
* 대비 부족 : 많은 소기관은 주변 세포질과 유사한 굴절률을 가지고 있습니다. 이러한 대비 부족으로 인해 Brightfield 현미경조차도 배경과 구별하기가 어렵습니다.
* 부적절한 염색 : 염색 기술은 특정 구조를 시각화하는 데 중요합니다. 얼룩이 특정 소기관에 잘 결합하지 않으면 보이지 않거나 정의되지 않은 상태로 보입니다.
3. 샘플 준비 :
* 인공물 : 현미경을 위해 세포를 제조하는 과정은 소기관을 모호하게하는 아티팩트를 도입 할 수 있습니다. 예를 들어, 고정, 임베딩 및 단면화는 세포 구조를 왜곡 할 수 있습니다.
* 세포 두께 : 세포가 너무 두껍다면 빛이 불분명하게 흩어져서 특정 소기관을 식별하기가 어려울 수 있습니다.
4. 현미경 유형 :
* 광학 현미경 : 강력하지만 광학 현미경은 미세 구조를 해결하는 데 고유 한 한계가 있습니다.
* 전자 현미경 : TEM (Transmission Electron Microscopy)과 같은 기술은 훨씬 높은 해상도를 제공하여 리보솜과 같은 작은 소기관과 미토콘드리아의 내부 구조를 시각화 할 수 있습니다. 그러나 TEM에는 광범위한 샘플 준비가 필요하며 인공물을 도입 할 수도 있습니다.
5. 세포의 생리적 상태 :
* 동적 구조 : 소포체 (ER) 및 골지 장치와 같은 일부 소기관은 모양과 위치가 끊임없이 변화하고 있습니다. 이러한 동적 특성은 고정 된 표본에서 덜 정의 된 것처럼 보일 수 있습니다.
6. 라이브 셀 이미징 :
* 운동 : 살아있는 세포는 역동적이며 소기관은 끊임없이 움직이고 변화합니다. 형광 현미경과 같은 고급 기술에서도 이러한 구조를 영상화하는 것은 어려울 수 있습니다.
* 세포 과정 : 단백질 합성 또는 막 트래 피킹과 같은 진행중인 세포 과정은 또한 소기관의 선명도에 영향을 줄 수 있습니다.
요약하면, 몇 가지 요인이 현미경 하에서 세포 소기관의 가시성에 영향을 줄 수 있습니다. 이러한 한계를 이해하면 연구자들은 적절한 현미경 기술과 샘플 준비 방법을 선택하여 관찰의 명확성을 극대화 할 수 있습니다.
