1. RNA 획득 : 첫 번째 단계는 세포 또는 관심있는 조직으로부터 RNA를 분리하는 것입니다. 이것은 단백질에 대한 유전자 코드 또는 rRNA 또는 TRNA와 같은 다른 유형의 RNA를 운반하는 mRNA 일 수 있습니다.
2. 역전사 : 이어서, 분리 된 RNA는 역전사 효소 및 기타 필요한 성분과 혼합된다.
* 프라이머 : RNA 분자의 특정 영역에 결합하는 짧은 서열의 DNA. 이것은 역전사 효소의 출발점 역할을합니다.
* DNTPS (Deoxynucleotide Triphosphates) : DNA의 빌딩 블록.
3. DNA 합성 : 역전사 효소는 RNA 주형과 프라이머를 사용하여 상보적인 DNA 가닥 (cDNA)을 생성합니다.
4. cDNA 분리 및 증폭 : 이어서 새로 합성 된 cDNA를 RNA 주형으로부터 분리시킨다. 응용 프로그램에 따라 PCR (중합 효소 연쇄 반응)과 같은 기술을 사용하여 많은 카피를 생성 할 수 있습니다.
이 정보가 어떻게 변환되는지는 다음과 같습니다.
* RNA에서 DNA : 핵심 전환은 RNA에서 DNA로이므로 과학자들은보다 안정적인 DNA 분자와 협력 할 수 있습니다.
* 유전자 발현 : 생성 된 cDNA는 원래 샘플에 존재하는 RNA 수준을 반영합니다. 이 정보는 어떤 유전자가 적극적으로 전사되고 단백질로 번역되는지를 밝힐 수 있습니다.
* 유전자 복제 : cDNA는 벡터에 삽입되어 박테리아로 클로닝 될 수 있습니다. 이것은 연구 또는 치료 목적으로 특정 유전자의 질량 생산을 허용합니다.
역전사 효소의 사용 :
* 유전자 발현 분석 : 다른 세포와 조직에서 어떤 유전자가 활성화되는지 연구합니다.
* 진단 테스트 : RNA 게놈이있는 HIV와 같은 바이러스의 존재를 검출합니다.
* 유전자 요법 : 치료 유전자를 세포로 전달합니다.
* 생명 공학 : 치료 또는 산업 사용을위한 단백질 및 기타 분자를 생성합니다.
역전사 효소를 통해 연구원들은 RNA로 인코딩 된 유전자 정보를 연구하고 조작하여 다양한 과학 및 의학 분야에서 많은 가능성을 열어줍니다.
