* 제한 효소 : 이 효소는 분자 가위처럼 작용하여 특정 서열에서 DNA를 절단합니다. 그것들은 플라스미드와 관심있는 유전자에 호환되는 목적을 만드는 데 중요합니다.
* 리가 제 : 이 효소는 분자 접착제처럼 작용하여 플라스미드의 절단 말단과 유전자를 함께 결합하여 재조합 플라스미드를 형성합니다.
과정을 세분화합시다.
1. 제한 다이제스트 : 플라스미드와 관심 유전자는 동일한 제한 효소로 절단된다. 이것은 호환되는 끈적 끈적한 끝을 만듭니다.이 끝은 짧은 단일 가닥 돌출부입니다.
2. 결찰 : 절단 플라스미드 및 유전자는 리가 제 효소와 함께 혼합된다. 리가 제는 끈적 끈적한 끝을 결합하여 새로운 유전자를 함유하는 원형 플라스미드를 형성한다.
다른 중요한 효소 :
* DNA 폴리머 라제 : 이 효소는 DNA의 틈을 메우는 데 사용될 수 있습니다. 특히 제한 다이제스트가 끈적 끈적한 돌출부없이 둔기 끝을 생성하는 경우.
* 알칼리성 포스파타제 : 이 효소는 플라스미드의 자기 연도를 방지하는 데 사용될 수 있으며, 플라스미드가 하나의 제한 효소만으로 절단되면 발생할 수 있습니다.
요약 : 제한 효소와 리가 제의 조합은 플라스미드에 새로운 유전자를 삽입하는 데있어 핵심 플레이어입니다. 다른 효소는 복제 과정의 특정 세부 사항에 따라 사용될 수 있습니다.
