광학 현미경의 한계 :
* 해상도 : 광학 현미경은 두 개의 밀접하게 간격을 두는 물체를 구별하는 능력이 제한적입니다. 이것을 해상도 한도 라고합니다 약 200 나노 미터입니다. 이것은 200 나노 미터보다 작은 것이 흐리거나 보이지 않는 것처럼 보일 것임을 의미합니다.
* 대비 : 빛 현미경은 시편을 통과하는 빛에 의존합니다. 시편에 주변 매체와 유사한 굴절률이 있으면 그다지 다르게 보이지 않으며보기가 어렵습니다.
* 빛의 파장 : 광학 현미경에 사용되는 가시광의 파장은 해상도를 제한하여 파장보다 작은 구조물의 시각화를 방지합니다.
특정 구조가 보이는 이유 :
* 크기 : 핵, 세포막 및 일부 소기관 (예를 들어, 미토콘드리아, 엽록체)과 같이 200 나노 미터보다 큰 구조는 가벼운 현미경으로 쉽게 볼 수 있습니다.
* 대비 : 주변 매체와는 다른 굴절률을 갖는 구조는 빛이 다르게 산란하여 더 어둡거나 밝게 보이게하여 대비와 가시성이 증가합니다.
* 염색 : 많은 기술이 염료를 사용하여 특정 구조를 염색하여 대비를 증가시키고 광학 현미경으로 볼 수 있습니다.
* 준비 : 시편이 관찰을 위해 준비되는 방식도 역할을합니다. 얇은 슬라이스 (섹션) 또는 평평한 준비는 가벼운 침투 및 더 나은 가시성에 도움이됩니다.
광학 현미경으로 보이지 않는 구조 :
* 작은 구조 : 리보솜, 단백질, DNA 분자 및 기타 작은 구조는 너무 작아서 광학 현미경으로 해결 될 수 없습니다.
* 투명 구조 : 일부 구조는 투명하고 주변 매체와 유사한 굴절률을 가지므로 염색없이보기가 어렵습니다.
작은 구조를 시각화하기위한 대체 기술 :
* 전자 현미경 : 전자 현미경은 빛 대신 전자 빔을 사용하여 훨씬 높은 해상도 (0.1 나노 미터까지)를 허용합니다. 그들은 세포와 개별 분자의 상세한 내부 구조를 밝힐 수 있습니다.
* 형광 현미경 : 이 기술은 특정 구조에 결합하는 형광 염료를 사용하여 어두운 배경에 보일 수 있습니다.
* 초 고해상도 현미경 : 자극 된 방출 고갈 (STED) 현미경과 같은 진보 된 기술은 광학 현미경의 회절 한계를 극복하고 200 나노 미터보다 작은 구조를 시각화 할 수 있습니다.
요약 : 광학 현미경은 세포를 연구하기위한 강력한 도구이지만, 그 한계는 특정 구조 만 볼 수 있음을 의미합니다. 전자 현미경 또는 형광 현미경과 같은 대체 기술을 사용하면 훨씬 높은 해상도에서 세포의 복잡한 세부 사항을 탐색 할 수 있습니다.