1. DNA 시퀀싱 :
* 직접 시퀀싱 : 이것은 가장 일반적이고 간단한 방법입니다. 관심있는 DNA 영역은 PCR (중합 효소 연쇄 반응)을 사용하여 증폭 된 다음 자동화 된 시퀀싱 기술을 사용하여 시퀀싱된다. 이어서 서열은 기준 서열 (일반적으로 야생형 또는 정상 서열)과 비교된다. 서열의 차이는 돌연변이를 나타낸다.
* 차세대 시퀀싱 (NGS) : 이것은 수백만 개의 DNA 단편을 동시에 시퀀싱 할 수있는 고 처리량 시퀀싱 기술입니다. NGS는 특히 게놈의 큰 영역에서 돌연변이를 검출하거나 세포 집단에서 돌연변이를 확인하는데 특히 유용하다.
2. 전기 영동 :
* 제한 조각 길이 다형성 (RFLP) : 이 기술은 특정 서열에서 DNA를 절단하는 제한 효소를 사용합니다. 돌연변이가 제한 부위를 변경하면 생성 된 DNA 단편의 크기가 변경됩니다. 이것은 겔 전기 영동을 사용하여 시각화 될 수있다.
* 단일 가닥 형태 형태 다형성 (SSCP) : 이 기술은 돌연변이가있는 단일 가닥 DNA 분자가 다르게 접힌다는 사실을 사용합니다. 다르게 접힌 분자는 겔에서 다르게 이동하여 돌연변이의 검출을 허용한다.
3. 분자 분석 :
* 대립 유전자-특이 적 올리고 뉴클레오티드 (ASO) 혼성화 : 이 기술은 특정 대립 유전자에 상보적인 짧은 DNA 프로브를 사용합니다. 돌연변이 대립 유전자와 일치하는 프로브는 DNA에 혼성화되는 반면, 야생형 대립 유전자와 일치하는 프로브는 그렇지 않을 것이다.
* 돌연변이-특이 적 프라이머와의 중합 효소 연쇄 반응 (PCR) : PCR 프라이머는 돌연변이 된 대립 유전자를 구체적으로 증폭 시키도록 설계되었습니다. 돌연변이가 존재하는 경우, PCR 생성물은 증폭되며 돌연변이가 없으면 증폭되지 않습니다.
4. 표현형 분석 :
* 관찰 가능한 특성의 변화 : 일부 돌연변이는 색, 크기 또는 행동의 변화와 같은 유기체의 표현형의 관찰 가능한 변화를 초래합니다. 이러한 변화는 돌연변이가있는 개인을 식별하는 데 사용될 수 있습니다.
* 기능 분석 : 이것은 돌연변이 된 유전자에 의해 암호화 된 단백질 또는 효소의 활성을 시험하는 것을 포함한다. 단백질 또는 효소가 비 기능적이거나 활성이 변경된 경우, 이것은 돌연변이를 식별하는 데 사용될 수 있습니다.
5. 세포 배양 기술 :
* 불멸화 된 세포주 : 특정 세포주는 실험실에서 성장할 수 있으며 돌연변이를 연구하는 데 사용될 수 있습니다. 이들 세포주는 세포 성장, 증식 및 다른 세포 과정에 대한 돌연변이의 영향을 조사하는데 사용될 수있다.
* 유전자 편집 기술 : CRISPR-CAS9와 같은 도구는 세포주에 특정 돌연변이를 도입하여 돌연변이의 효과에 대한 연구를 허용 할 수 있습니다.
6. 인구 연구 :
* 돌연변이 빈도 : 집단에서 돌연변이의 빈도를 연구함으로써 생물 학자들은 특정 질병 또는 표현형과 관련된 돌연변이를 식별 할 수 있습니다.
* 인구 유전학 : 인구 유전자 연구는 시간이 지남에 따라 돌연변이의 진화와 인구의 전반적인 체력에 미치는 영향을 추적 할 수 있습니다.
돌연변이가 발생했는지 여부를 결정하는 데 사용 된 방법은 특정 상황과 해결중인 연구 질문에 따라 달라질 것임을 주목하는 것이 중요합니다. 여러 접근법을 결합하면 종종 돌연변이의 존재에 대한보다 강력한 증거를 제공 할 수 있습니다.
