재료 :
* 곰팡이 문화 : 원하는 곰팡이의 순수한 문화, 바람직하게는 한천 경사 또는 판에.
* 국물 미디어 : 곰팡이 성장에 적합한 멸균 액체 배지 (예 :사버 로우 덱스트로스 국물, 감자 덱스트로스 브로스).
* 멸균 Erlenmeyer 플라스크 또는 배양 튜브 : 사용중인 국물량에 적합한 크기.
* Bunsen 버너 또는 멸균 후드 : 멸균 환경을 유지합니다.
* 멸균 접종 루프 또는 바늘 : 곰팡이 배양을위한.
* 소독제 : 표면을 청소하기에 70% 에탄올 또는 기타 적합한 소독제.
* 장갑 : 전체 과정에서 깨끗한 장갑을 착용하십시오.
절차 :
1. 국물 준비 :
* 제조업체의 지침에 따라 국물 미디어를 준비하십시오.
* 121 ° C에서 15-20 분 동안 자동으로 전환하여 국물을 살균하십시오.
* 접종하기 전에 국물이 실온으로 식히도록하십시오.
2. 작업 영역을 살균 :
* 소독제로 작업 영역을 철저히 청소하십시오.
* Bunsen Burner를 사용하는 경우 밝히고 불꽃 주위에 멸균 구역을 만듭니다. 멸균 후드를 사용하는 경우 켜고 15 분 이상 실행할 수 있습니다.
3. 접종 도구 준비 :
* Bunsen Burner Flame (열에서 빨간색으로 가열) 또는 멸균 후드 (후드의 지시를 따르십시오)를 사용하여 접종 루프 또는 바늘을 멸균하십시오.
* 곰팡이 배양을 전달하기 전에 도구가 약간 식히도록하십시오.
4. 곰팡이 배양 :
* 멸균 구역 아래에서 곰팡이 배양 용기 (한천 경사 또는 판)를 엽니 다.
* Bunsen Burner를 사용하는 경우 용기 개구부를 간단히 불태 웁니다.
* 멸균 된 접종 도구를 사용하여 식민지의 가장자리에서 소량의 곰팡이 성장을 조심스럽게 제거하십시오.
* 접종원을 플라스크 나 튜브의 멸균 국물 매체로 옮깁니다.
* 접종원이 국물에 담겨 있는지 확인하십시오.
5. 인큐베이트 :
* 오염을 방지하기 위해 플라스크 나 튜브를 단단히 닫습니다.
* 곰팡이 종의 최적 온도에서 배양을 배양하십시오.
* 곰팡이의 성장을 정기적으로 모니터링하십시오.
안전 예방 조치 :
* 멸균 기술 : 오염을 방지하기 위해 공정 전반에 걸쳐 멸균을 유지하십시오.
* 실험실 안전 : 곰팡이 배양을 처리 할 때 실험실 코트, 장갑 및 시선을 착용하십시오.
* 곰팡이 포자 : 일부 곰팡이는 호흡기 문제를 일으킬 수 있으므로 곰팡이 포자가 공중으로 될 가능성을 염두에 두십시오. 환기가 잘되는 지역에서 일하십시오.
중요한 메모 :
* 곰팡이 종 : 특정 절차는 작업중인 곰팡이의 유형에 따라 약간 달라질 수 있습니다. 지침을 위해 적절한 문헌을 참조하거나 Mycologist와 상담하십시오.
* 성장 조건 : 특정 곰팡이 종의 요구 사항에 따라 인큐베이션 조건 (온도, pH 등)을 최적화하십시오.
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