이유는 다음과 같습니다.
* 알칼리성 용액 denature DNA : 높은 pH 용액 (알칼리성)은 두 가닥의 DNA를 함께 유지하는 수소 결합을 파괴하여 단일 가닥 DNA로 이어집니다. 이것은 혼성화에 유용한 것처럼 보일 수 있지만, 프로세스에 사용 된 프로브를 변성시켜 비효율적입니다.
* 하이브리드 화는 단일 가닥 DNA :에 의존합니다 혼성화는 상보적인 단일 가닥 DNA 분자 사이에서 발생한다 . 그러나 변성 과정은 신중하게 제어되어야합니다.
여기에는 프로세스가 일반적으로 작동하는 방법입니다.
1. DNA는 변성됩니다 : DNA는 고온 (일반적으로 약 95 ℃)으로 가열되어 수소 결합을 파괴하고 가닥을 분리한다.
2. 하이브리드 화 : 이어서, 변성 된 DNA (표적 DNA)를 천천히 냉각시켜 보완적인 프로브 가닥이 표적 서열에 어닐링 (하이브리드 화) 할 수있게한다.
3. 알칼리성 처리 (선택 사항) : * 하이브리드 화 후 일부 프로토콜은 가벼운 알칼리성 솔루션을 사용하여 결합되지 않은 프로브를 제거합니다.
따라서, 알칼리성 처리는 혼성화 전에 사용되지 않지만 결합되지 않은 프로브의 세척 및 제거를위한 혼성화 후 특정 단계에서 사용될 수있다. .
