기본 이해
* tris-hcl : 이것은 트리스 (트리스 (하이드 록시 메틸) 아미노 메탄)와 염산 (HCL)을 결합하여 제조 된 완충액입니다.
* 10 mm : 이것은 10 밀리 몰의 약자이며, 용액의 농도를 나타냅니다. 이는 용액 리터당 10 밀리몰의 Tris-HCL이 있음을 의미합니다.
재료
* 트리스베이스 (자유베이스) : 특정 양의 트리스베이스 파우더가 필요합니다.
* 염산 (HCl) : HCL의 농축 용액 (보통 1m 또는 12m)이 필요합니다.
* 탈 이온수 : 고품질의 탈 이온수를 정확하게 사용하십시오.
* 졸업 된 실린더 : 볼륨을 정확하게 측정합니다.
* 계량 규모 : 트리스베이스 파우더의 정확하게 무게를 측정합니다.
* pH 미터 (선택 사항) : 정확한 pH 조정을 위해.
계산
1. 트리스베이스의 분자량 : 트리스베이스의 분자량은 121.14 g/mol입니다.
2. 필요한 트리스베이스의 질량을 계산합니다. Tris Base의 질량을 계산하기 위해 다음 공식을 사용하게됩니다.
* 질량 (g) =(농도 (mm) × 분자량 (g / mol) × 부피 (l)) / 1000
* 1 리터 (1000 ml)의 10 mm 용액 :
* 질량 =(10 mm × 121.14 g / mol × 1 L) / 1000
* 질량 =1.2114 g
절차
1. 무게의 트리스베이스 : 계산 된 Tris베이스 (1 리터의 1.2114 g)를주의 깊게 평가하십시오.
2. 트리스베이스를 물에 녹인다 : 트리스베이스를 적절한 용기에 약 800ml의 탈 이온수에 추가하십시오. 분말이 완전히 녹을 때까지 저어줍니다.
3. pH : 조정
* pH 미터 사용 : pH 미터로 pH를 지속적으로 모니터링하면서 TRIS 용액에 농축 된 HCl을 낙하산으로 추가하십시오. pH를 원하는 값으로 조정하십시오 (일반적으로 Tris-HCL 버퍼의 경우 약 7.5 ~ 8.5).
pH 미터가없는 * : 약 0.5 mL의 농축 HCl (1 L 용액)을 첨가하십시오. 용액을 저어 PH 용지를 사용하여 pH를 확인하십시오. 원하는 pH가 달성 될 때까지 HCL 부피를 조정하십시오.
4. 솔루션을 최종 볼륨으로 가져옵니다 : pH를 조정 한 후, 탈 이온수를 첨가하여 용액의 총 부피를 1 리터로 가져옵니다.
5. 멸균 : 자동 클레이핑으로 필요한 경우 솔루션을 살균하십시오.
중요한 메모
* pH 조정 : 원하는 pH에 도달하는 데 필요한 정확한 HCL은 TRIS 염기의 순도 및 HCl 용액의 농도에 따라 약간 달라집니다.
* 정확도 : 정확한 준비를 보장하기 위해 정확한 계량 척도와 졸업 된 실린더를 사용하십시오.
* 스토리지 : Tris-HCL 용액을 실온 또는 냉장고에 보관하십시오.
* 저장 수명 : Tris-HCL 솔루션은 일반적으로 유적 수명이 우수하지만 항상 분해 징후 (예 :변색, 흐림)를 확인하는 것이 가장 좋습니다.
궁금한 점이 있거나 다른 농도 나 부피의 TRIS-HCL 솔루션을 준비하고 싶다면 알려주십시오. 도와 드리겠습니다!
