작동 방식은 다음과 같습니다.
1. 탈 양성자 : 알칼리 용액으로부터의 수산화물 이온 (OH-)은 DNA 분자의 수소 원자, 특히 염기 쌍 사이의 수소 결합에 관여하는 것과 반응한다. 이것은 염기에서 양성자 (h+)를 제거하여 탈 양성자 화를 초래합니다.
2. 베이스 페어링 중단 : 탈 양성자화 된 염기는 수소 결합을 효과적으로 형성하는 능력을 상실합니다. 두 가닥의 DNA를 함께 유지하는 수소 결합은 약화되어 결국 분리됩니다.
3. 가닥 분리 : 수소 결합이 파손됨에 따라 DNA의 이중 나선 구조는 풀리고 두 가닥은 분리되어 있습니다. 이 과정을 denaturation 라고합니다 .
키 포인트 :
* pH 감도 : DNA는 pH 변화에 민감하다. 알칼리성 조건 (높은 pH)은 수소 결합의 섬세한 균형을 방해합니다.
* 기본 특이 적 변성 : 상이한 염기는 다른 pH 수준에서 변성한다. 예를 들어, 3 개의 수소 결합을 갖는 구아닌-시토신 (G-C) 염기 쌍은 2 개의 수소 결합을 갖는 아데닌-티민 (A-T) 염기 쌍보다 더 안정적이다.
* 가역 변성 : 알칼리 용액에 의한 DNA의 변성은 일반적으로 가역적이다. 적절한 조건에서, 분리 된 가닥은 다시 연관하여 이중 나선 구조를 다시 형성 할 수있다.
DNA 변성의 적용 :
알칼리 솔루션에 의한 DNA의 변성은 다음을 포함하여 분자 생물학에 몇 가지 응용을 가지고있다.
* DNA 추출 : DNA 추출 동안 DNA를 다른 세포 성분과 분리하는 데 사용됩니다.
* 혼성화 : 그것은 남부 블 롯팅과 같은 많은 분자 기술에 필수적인 상보적인 DNA 가닥의 혼성화를 촉진합니다.
* DNA 시퀀싱 : 변성은 다양한 DNA 시퀀싱 기술에서 중요한 단계입니다.
중요한 참고 : 알칼리 용액은 효과적으로 DNA를 변성하지만 시간이 지남에 따라 DNA를 저하시킨다. 따라서, 분해를 최소화하고 DNA의 완전성을 보장하기 위해 반응 조건을 신중하게 제어해야한다.
