고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC) :파괴
고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)는 복잡한 혼합물에서 성분을 분리, 식별 및 정량화하는 데 사용되는 강력한 분석 기술입니다. 그것은 분자를위한 정교한 분류 시스템과 같습니다. 약물 발견에서부터 환경 분석에 이르기까지 다양한 응용에 대한 고해상도와 민감도를 제공합니다.
작동 방식은 다음과 같습니다.
1. 샘플 소개 : 샘플은 시스템에 주입되며, 일반적으로 적합한 용매에 용해된다.
2. 이동 단계 : 샘플은 "이동상"이라는 액체 용매에 의해 시스템을 통해 운반됩니다. 이 단계는 고압 하에서 컬럼을 통해 펌핑되어 일관된 유량을 보장합니다.
3. 고정 단계 : 컬럼은 "고정상"으로 알려진 고체 재료로 채워져 있습니다. 이 단계는 샘플의 구성 요소와 다르게 상호 작용하여 분리를 초래합니다.
4. 분리 : 샘플이 컬럼을 통과함에 따라, 구성 요소는 물리적 및 화학적 특성에 기초하여 고정상과 상호 작용합니다. 다른 구성 요소는 다르게 상호 작용하여 다양한 유지 시간 (구성 요소가 열을 통과하는 데 걸리는 시간)을 초래합니다.
5. 탐지 : 분리 후, 성분은 컬럼에서 용리하고 특정 검출기에 의해 감지된다. 이 검출기는 UV/VIS 분광 광도계, 형광 검출기 또는 질량 분석기 일 수 있습니다.
6. 데이터 분석 : 검출기는 크로마토 그램으로 변환되는 신호를 생성합니다. 이 크로마토 그램은 분리 된 구성 요소의 시각적 표현으로, 유지 시간과 피크 영역을 보여줍니다.
HPLC의 고성능의 열쇠는 구성 요소에 있습니다.
* 고압 : 이 시스템은 고압, 일반적으로 100-400 bar 하에서 작동하여 유량이 빠르고 해상도가 향상됩니다.
* 작은 입자 크기 : 고정상은 일반적으로 1.8-10 µm의 작은 입자로 구성되어 샘플 성분과의 상호 작용을위한 더 큰 표면적을 제공하여 우수한 분리를 초래합니다.
* 정확한 흐름 제어 : 이 시스템은 펌프를 사용하여 이동상의 정확하고 일정한 흐름을 전달하여 재현 가능한 결과를 보장합니다.
HPLC의 유형 :
* 역상 크로마토 그래피 : 이것은 정지상이 비극성이고 이동상이 극단 인 가장 일반적인 유형입니다. 성분은 소수성에 따라 분리되며, 더 많은 소수성 성분이 나중에 용리됩니다.
* 정상 상 크로마토 그래피 : 이 유형에서 고정상은 극성이고 이동상은 비극성입니다. 성분은 극성에 따라 분리되며, 더 많은 극성 성분은 나중에 용리됩니다.
* 이온 교환 크로마토 그래피 : 이 기술은 충전 된 고정 단계 및 이온 이동 단계를 사용하여 충전에 따라 구성 요소를 분리합니다.
HPLC의 응용 :
* 약물 발견 및 개발 : 의약품의 순도 분석, 불순물 식별, 약동학 적 연구.
* 환경 모니터링 : 물, 공기 및 토양의 오염 물질 분석.
* 식품 화학 : 식품 첨가제, 오염 물질 및 영양소 분석.
* 법의학 : 약물, 독 및 폭발물 분석.
* 생화학 및 생명 공학 : 단백질, 펩티드 및 기타 생물학적 분자의 분석.
전반적으로, HPLC는 감도, 해상도 및 재현성이 높은 강력하고 다양한 분석 기술입니다. 그것은 복잡한 혼합물의 식별, 정량 및 정제를 지원하는 많은 과학 분야에서 중요한 역할을합니다.
