1. 유전자 분리 :
* 유전자를 식별하십시오 : 과학자는 먼저 삽입하려는 특정 유전자를 알아야합니다. 여기에는 알려진 유전자의 데이터베이스 검색 또는 원하는 특성을 담당하는 유전자를 식별하기위한 실험을 수행하는 것이 포함될 수 있습니다.
* 유전자를 얻으십시오 : 유전자는 다양한 출처에서 얻을 수 있습니다.
* 다른 유기체에서 복제 : 유전자는 PCR (중합 효소 연쇄 반응)과 같은 기술을 사용하여 다른 유기체로부터 증폭 (복사) 될 수있다.
* 유전자 합성 : 유전자 서열이 알려진 경우 실험실에서 인위적으로 합성 될 수 있습니다.
2. 벡터 준비 :
* 적절한 벡터를 선택하십시오 : 벡터는 유전자를 박테리아 세포로 전달하는 캐리어 분자입니다. 일반적인 벡터는 플라스미드 (작은, 원형 DNA 분자) 또는 바이러스 (박테리오파지)를 포함한다.
* 벡터 수정 : 벡터는 관심 유전자를 삽입 할 수있는 "제한 부위"라는 특수 서열을 포함하도록 변형된다. 이것은 종종 특정 부위에서 DNA를 인식하고 절단하는 특정 효소 (제한 효소)로 벡터를 절단하는 것을 포함합니다.
3. 유전자 삽입 (결찰) :
* 유전자와 벡터를 결합하십시오 : 단리 된 유전자 및 절단 벡터는 DNA 리가 제라는 효소의 존재하에 함께 혼합된다.
* 결찰 : DNA 리가 제는 유전자와 벡터의 끝을 결합하여 재조합 DNA 분자를 생성합니다.
재조합 DNA 분자가 생성되면, 다음 단계는 박테리아 (변형)에이를 도입하고 새로운 유전자를 성공적으로 취한 박테리아를 선택하는 것을 포함합니다.
