1. 인식 사이트 :
- 제한 효소는 "인식 사이트"라는 특정 DNA 서열을 인식합니다. 이 사이트의 길이는 일반적으로 4-8 기본 쌍이며 Palindromic이므로 반대 가닥에서 동일한 전진과 뒤로 읽습니다.
예를 들어, 제한 효소 Ecori는 서열 GAATTC를 인식합니다.
2. 절단 :
- 제한 효소가 인식 부위를 찾으면 DNA에 결합하여 DNA 골격 내의 포스 포 디 에스테르 결합을 절단합니다.
- 일부 효소는 "무뚝뚝하게"자르고 돌출부가없는 깨끗한 휴식을 남깁니다.
- 다른 사람들은 "끈적 끈적한"을 자르고, 서로 보완적인 단일 가닥 돌출부로 비틀 거리는 끝을 남깁니다. 그런 다음이 끈적 끈적한 끝을 사용하여 다른 DNA 단편을 결합 할 수 있습니다.
3. 조각화 :
- DNA 분자는 이제 제한 효소가 작용하는 지점에서 작은 조각으로 절단됩니다. 단편의 수와 크기는 DNA 분자에 존재하는 인식 부위의 수와 효소의 절단 패턴에 의존한다.
응용 프로그램 :
제한 효소는 수많은 응용 분자 생물학에서 중요한 도구입니다.
- DNA 클로닝 : 동일한 제한 효소로 절단 된 단편을 결합하여 재조합 DNA를 생성합니다.
- DNA 매핑 : 염색체에서 유전자 및 기타 서열의 위치를 식별합니다.
- 유전 공학 : 바람직한 특성으로 변형 된 유기체를 만듭니다.
- 법의학 : 개인을 식별하기 위해 DNA 샘플을 분석합니다.
- 유전자 요법 : 수정 된 버전을 도입하여 결함이있는 유전자를 수리합니다.
예 :
서열이있는 DNA 분자를 상상해보십시오.
```
... agtcgaattcctag ...
```
제한 효소 Ecori (GAATTC 인식)를 사용하면 다음 시점에서 DNA를 줄입니다.
```
... AGTC GAATTC CTAG ...
```
이로 인해 끈적 끈적한 끝이있는 두 개의 DNA 조각이 발생합니다.
```
... AGTC
... CTAG ...
```
그런 다음이 끈적 끈적한 끝을 사용하여 다른 DNA 단편 절단과 동일한 효소와 결합하여 새로운 재조합 DNA 분자를 만듭니다.
