* 체인 종료 : DDNTP는 DNA 폴리머 라제가 성장 사슬에 다음 뉴클레오티드를 첨가하는데 필요한 3'- 하이드 록실기가 없다. 이는 DDNTP가 DNA 가닥에 통합 될 때 체인을 더 확장 할 수 없음을 의미합니다.
* 형광 표지 : 각 유형의 DDNTP (DDATP, DDCTP, DDGTP, DDTTP)는 다른 형광 염료로 표시됩니다. 이것은 서열에서 각 뉴클레오티드를 식별 할 수있게한다.
* 조각의 사다리 생성 : 시퀀싱 동안, 정상 뉴클레오티드 (DNTP) 및 DDNTP의 혼합물이 사용된다. 폴리머 라제는 정상 또는 디 옥시 뉴클레오티드를 무작위로 포함시킬 것이다. 이는 다양한 길이의 DNA 단편의 혼합물을 초래하며, 각각 DDNTP의 혼입으로 인해 특정 뉴클레오티드에서 종결된다.
* 시퀀스 읽기 : 이들 단편을 크기 (일반적으로 전기 영동을 통해)별로 분리하고 형광 라벨을 검출함으로써, 원래 DNA 단편에서 정확한 뉴클레오티드 서열을 결정할 수있다.
따라서 실험실은 다음과 같은 이유로 Dideoxy nucleotides를 사용하고있을 수 있습니다. .
* 게놈 분석 : 돌연변이, 변이 및 기타 유전자 정보를 확인하기 위해 전체 게놈 또는 특정 유전자를 시퀀싱합니다.
* 법의학 : 개인을 식별하거나 용의자를 범죄 현장에 연결하기위한 DNA 프로파일 링.
* 의료 진단 : 유전자 장애를 식별하거나 병원체를 검출하거나 질병 진행을 모니터링합니다.
* 연구 : 유전자 발현, 단백질 기능 및 진화 관계 연구.
요컨대, 다드 옥시 뉴클레오티드는 다양한 과학 및 의료 응용 분야에 사용되는 강력한 도구 인 Sanger 시퀀싱 방법에 중요합니다.
