이유는 다음과 같습니다.
* Beer-Lambert 법 : 흡광도, 농도 및 경로 길이 사이의 관계는 Beer-Lambert 법에 의해 정의됩니다.
* a =εBC
* 어디:
* a =흡광도
* ε =어금니 흡수 (물질 및 파장에 특정한 일정)
* b =경로 길이 (보통 분광 광도계에서 1cm)
* C =농도
* 어금니 흡수율은 핵심입니다. 몰 흡수성 (ε)은 특정 파장에서 1cm 큐벳에서 물질의 1m 용액의 특이 적 흡광도이다. 주어진 물질과 파장의 경우 일정합니다.
이론적 흡광도를 찾으려면 다음이 필요합니다.
1. 340 nm에서 NADH의 몰 흡수율 (ε) : 이 값은 일반적으로 분광 광도계에 대한 참조 서적 또는 데이터베이스에서 찾을 수 있습니다.
2. 농도 (c) : 당신은 이것을 0.01 M으로 제공했습니다.
3. 경로 길이 (b) : 표준 1cm 큐벳을 가정하십시오.
이 값이 있으면 Beer-Lambert Law를 사용하여 흡광도를 계산할 수 있습니다.
예 :
340 nm에서 NADH의 어금니 흡수율이 6220 m⁻¹cm⁻¹라고 가정 해 봅시다. 그러면 흡광도는 다음과 같습니다.
a =(6220 m 6¹cm⁻¹) (1 cm) (0.01 m) =62.2
중요한 참고 : 이론적 흡광도는 매우 많은 수가 될 수 있습니다. 그러나 실제 분광기는 정확하게 측정 할 수있는 흡광도에 제한이 있습니다.