PCR 구성 요소 및 그 기능 :
1. 템플릿 DNA :
* 기능 : 증폭하려는 DNA 서열. 중합 효소 효소가 복사하기위한 청사진 역할을합니다.
2. 프라이머 :
* 기능 : 주형 DNA의 특정 영역에 상보적인 짧은 단일 가닥 DNA 서열 (일반적으로 18-30 뉴클레오티드). 그들은 주형 DNA에 결합하고 DNA 폴리머 라제에 대한 출발점을 제공한다.
3. DNA 폴리머 라제 :
* 기능 : 주형 DNA 및 프라이머를 사용하여 새로운 DNA 가닥을 합성하는 효소. 프라이머의 3 '끝에 뉴클레오티드를 5'내지 3 '방향으로 추가합니다.
4. 데 옥시 뉴 클레오 사이드 트리 포스페이트 (DNTP) :
* 기능 : DNA의 빌딩 블록. 이들은 4 가지 유형의 4 가지 유형으로 구성되어 있으며, 이는 4 개의 염기 (아데닌, 시토신, 구아닌 및 티민)를 나타냅니다. DNA 폴리머 라제는 이들을 사용하여 새로운 DNA 가닥을 조립합니다.
5. 버퍼 용액 :
* 기능 : 최적의 DNA 폴리머 라제 활성을 위해 적절한 pH 및 이온 성 강도를 유지하는 염 및 이온이 들어 있습니다.
6. 클로라이드 마그네슘 (mgcl2) :
* 기능 : 촉매 활성에 필요한 DNA 폴리머 라제에 대한 보조 인자. 또한 DNA 구조를 안정화시키는 데 도움이됩니다.
7. 물 :
* 기능 : 반응을위한 용매 및 성분이 상호 작용할 수있는 매체를 제공합니다.
PCR 프로세스에 대한 간단한 요약은 다음과 같습니다.
1. 변성 : 반응 혼합물을 94-98 ℃로 가열하여 이중 가닥 주형 DNA를 단일 가닥으로 분리시킨다.
2. 어닐링 : 온도는 50-65 ℃로 낮아져 프라이머가 단일 가닥 템플릿 DNA에서 상보 적 서열에 결합 할 수있게한다.
3. 확장 : 온도는 DNA 폴리머 라제의 최적 온도 인 72 ℃로 상승한다. 중합 효소는 프라이머를 연장하여 새로운 DNA 가닥을 생성하기 위해 DNTP를 첨가합니다.
이 세 단계는 다수의 사이클에 대해 반복되어 표적 DNA 서열의 지수 증폭을 초래한다.
