재료 :
* 트리스베이스 : 트리스 (하이드 록시 메틸) 아미노 메탄 (분자량 :121.14 g/mol)
* 염산 (HCl) : 집중 (보통 37%)
* 탈 이온 또는 증류수 :
* pH 미터 또는 pH 종이 :
* 비이커 또는 플라스크 :
* 졸업 된 실린더 :
* 교반 판 또는 자기 교반기 :
* 안전 고글과 장갑 :
절차 :
1. 트리스베이스의 양을 계산합니다 :
* 0.5m 용액을 원하므로 용액 리터당 0.5 몰의 트리스베이스가 필요합니다.
* 원하는 몰토리성에 트리스의 분자량을 곱합니다 :0.5 mol/l * 121.14 g/mol =60.57 g/L
* 일반적인 1 L 솔루션의 경우 60.57 그램의 트리스베이스가 필요합니다.
2. 트리스베이스를 녹인다 :
* 계산 된 트리스베이스 (1 L의 60.57 g)의 무게를 측정하십시오.
* 비이커 나 플라스크에 약 800ml의 탈 이온수를 첨가하십시오.
* 트리스베이스를 천천히 첨가하면서 물을 부드럽게 저어줍니다. 물이 따뜻하면 트리스베이스가 더 쉽게 용해됩니다.
* 트리스베이스가 완전히 녹을 때까지 계속 저어줍니다.
3. pH : 조정
* 중요한 참고 : 항상 물에 산을 첨가하고 산에 물을 절대로하지 마십시오. 그렇게하면 폭력적이고 발열 반응이 발생할 수 있습니다.
* pH 미터 사용 : 용액을 지속적으로 저어 주면서 농축 된 HCl을 조심스럽게 첨가하십시오. pH 미터로 pH를 모니터링하십시오.
* pH 종이 사용 : HCl 드롭 시위를 추가하고 각 첨가 후 pH 종이로 pH를 테스트하십시오. 원하는 pH 7.2에 도달 할 때까지 계속하십시오.
4. 볼륨 조정 :
* 올바른 pH에 도달하면 탈 이온수를 더 추가하여 용액의 최종 부피를 1 L로 가져옵니다.
5. 버퍼를 저장하십시오 :
* 준비된 Tris-HCL 버퍼를 실온 (약 20-25 ° C) 또는 냉장고에 4 ° C에 보관하십시오. 증발과 오염을 방지하기 위해 밀봉 된 용기에 보관하는 것이 가장 좋습니다.
중요한 고려 사항 :
* 안전 : 화학 물질, 특히 농축 된 HCL을 취급 할 때 항상 적절한 안전 고글과 장갑을 착용하십시오. 환기가 잘되는 지역에서 일하십시오.
* pH 정확도 : pH 용지를 사용하는 경우 정확한 pH 판독 값을 보장하기 위해 볼륨을 조정해야 할 수도 있습니다. pH 미터가 더 정확합니다.
* 희석 : 더 적은 양의 버퍼가 필요한 경우 트리스베이스와 물의 양을 그에 따라 조정하십시오.
* 안정성 : TRIS-HCL 버퍼는 일반적으로 올바르게 저장 될 때 몇 달 동안 안정적입니다. 그러나 버퍼가 오랫동안 저장된 경우 버퍼를 사용하기 전에 pH를 테스트하는 것이 좋습니다.
다른 볼륨의 버퍼에 필요한 볼륨을 계산하는 데 도움이되거나 다른 질문이 있으면 알려주십시오!
