AMES 테스트 :돌연변이 인을 감지하기위한 간단하고 효과적인 도구
AMES 테스트는 화학 물질의 변이원성 잠재력을 평가하는 데 널리 사용되고 매우 효과적인 방법으로 발암 잠재력을 강력하게 표시합니다. 그것은 역 돌연변이의 원리에 의존한다 , 살모넬라 티피 무리 움의 his-rains 박테리아. 작동 방식은 다음과 같습니다.
1. 출발점 :histrains와 히스티딘의 필요
* 테스트는 히스티딘 결핍 (HIS-) 인 Salmonella typhimurium * 박테리아의 특수 균주를 사용합니다. . 그들은 성장에 필수적인 아미노산 히스티딘을 생산하는 능력이 부족합니다.
*이 박테리아는 히스티딘이 보충 된 배지에서만 생존하고 자랄 수 있습니다.
2. 테스트 화학 물질 소개 :반전 찾기
* 시험 화학 물질은 히스티딘이없는 최소 배지와 함께 Hisbacteria를 포함하는 배양에 첨가된다.
* 돌연변이를 유발할 수있는 화학 물질의 잠재력은 그의 박테리아를 히스티딘- 독립적 (+) 로 되돌릴 수있는 능력에 의해 평가된다. 균주.
* 화학 물질이 박테리아 DNA에서 돌연변이를 유도하면 히스티딘을 생산하는 능력을 회복시켜 박테리아가 최소 매체에서 자랄 수 있습니다.
3. 식민지 계산 :정량적 평가
* 인큐베이션 후, 최소 배지에서 성장한 식민지의 수가 계산됩니다.
* 더 많은 수의 콜로니는 더 많은 수의+ 역전제를 나타내며, 따라서 화학 물질의 돌연변이 유발 가능성이 높습니다.
* 결과는 테스트 화학 물질이없는 대조군과 비교됩니다.
4. 시험 강화 :포유 동물 대사를위한 간 추출물
* 포유 동물 대사를 시뮬레이션하기 위해, 대사 효소를 함유 한 간 추출물이 종종 시험 혼합물에 첨가된다.
*이 단계는 많은 화학 물질이 원래 형태의 돌연변이 유발이 아니라 간에 의해 대사 된 후에도 그렇게되기 때문에 중요합니다.
5. 역 돌연변이의 원리
AMES 테스트는 역 돌연변이의 원리에 기초합니다. , 원래 기능 상실을 일으킨 돌연변이가 두 번째 돌연변이에 의해 역전되어 기능을 회복하는 경우. 이 경우, his- 균주는 히스티딘을 생성하는 능력이 부족합니다. 돌연변이가 발생하면 시험 화학 물질은 기능을 회복시키는 돌연변이를 유도하여 히스티딘을 생성하고 최소한의 매체에서 성장할 수있는 His+ 균주를 초래할 수있다.
한계와 장점 :
* AMES 테스트는 강력한 도구이지만 발암 성을 완벽하게 예측하는 것은 아닙니다.
* 일부 화학 물질은 돌연변이 유발이지만 발암 성이 아니며 그 반대도 마찬가지입니다.
* 그러나 AMES 테스트는 비교적 저렴하고 빠르며 수행하기 쉬우므로 잠재적으로 위험한 화학 물질을 식별하기위한 귀중한 1 차 스크리닝 도구입니다.
요약하면, AMES 테스트는 화학 물질의 돌연변이 유발 및 발암 잠재력을 평가하기위한 강력하고 효율적이며 신뢰할 수있는 수단을 제공하여 공중 보건 및 안전을 보장하는 데 중요한 역할을합니다. .
